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    猪瘟病毒荧光PCR检测试剂 非洲猪瘟检测试剂 48T
    2021-08-11 11:11:31   346
    价格:850.00 人民币
    品牌:维安泰
    型号:P1723
    显示方式:LCD数显
    结构型式:台式
    工作温度:0-35℃
    订购数量: - +
    商品参数 商品详情
    详细参数
    品牌维安泰型号P1723
    显示方式LCD数显结构型式台式
    工作温度0-35℃适用范围化工
    加工定制是否进口
    测量对象猪瘟病毒测量范围
    测量精度国标电源电压220
    分辨率0.1外形尺寸300*300*30MM
    产地深圳

     用名称:猪瘟病毒荧光RT-PCR检测试剂盒



         英文名称:Diagnostic Kit for Classical Swine Fever Virus (RT-PCR Fluorescence Probing)
    【预期用途】
    本试剂盒主要用于检测疑似感染猪血清及临床病料中的猪瘟病毒(CSFV,Classical Swine Fever Virus),适用于CSFV的检测、诊断和流行病学调

    【检测原理】
    本试剂盒采用柱式法提取 RNA,并以之为模板,针对猪瘟病毒特有基因片段设计特异性引物和TaqMan荧光探针,采用一步法RT-PCR进行反转录扩增靶序列,在PCR扩增过程中监测荧光信号的变化,实现对猪瘟病毒的快速检测。

     

    非洲猪瘟病毒荧光 PCR 核酸检测试剂盒(快提+预分装)

    使用说明书 兽用 【操作步骤】

    一、样品制备

    1、血液样品:采集抗凝血(抗凝剂为 EDTA)或血清样品,编号备用。

    2、组织样品:采集、肝脏、淋巴结、扁桃体等病变组织样品或软蜱 0.1g(黄豆粒大小),眼科剪剪

    碎于组织匀浆器或研钵中充分匀浆或研磨,再加 1mL 生理盐水混匀,4℃条件下 8000 rpm/分钟离心 2

    钟,取上清液于灭菌离心管中,编号备用。

    二、DNA 提取

    取反应液 A 20µL 分别加入到新的 1.5mL 离心管,加入抗凝血或血清或组织上清液 2 µL,混匀,室

    温(20℃左右)静置 3 分钟,加入反应液 B 20 µL,吹打混匀即可,若为抗凝全血,则需 8000rpm/分钟再

    离心 2 分钟后做为待检 DNA 溶液。

    三、PCR 扩增

    1、试剂准备:根据当次实验所需要的反应数(反应数=待检样本数+阴性对照+阳性对照),取等量的

    八联 PCR 反应管,在室温融化后,瞬离,并做好相应标记(操作过程要避光),剩余试剂放回-20℃冷冻

    保存;

    2、加样扩增:分别向 PCR 管中加入 5 µL 待检样本 DNA 或阴性对照或阳性对照,混匀并瞬离,放入

    荧光 PCR 仪上运行以下程序:

    荧光通道选择 FAM,在 40 循环阶段每个循环的 55℃时收集荧光信号。设置扩增体系为 25 µL,同时

    要选择 passive reference quencher none 的模式。

    (注:若荧光 PCR 仪( ABI7500)按说明书中的反应程序设置后因持温时间短无法运行,可将预扩增和 PCR

    扩增条件变更为 95℃:5 秒 55℃:30 秒。)

    【结果判定】

    1、基线和阈值设定:参照仪器自动产生或设定的阈值,手动阈值参照阴性对照上线设定。

    2、质量控制:反应结束后,阴性对照的检测结果应无特定的扩增曲线,Ct 值为>38 或无;阳性对照

    Ct 值应≤30.0,且明显的扩增曲线;否则实验视为无效。

    3、样品判定:待检样品荧光信号有指数型增加,且结果显示 Ct 值<35.0,报告为阳性;未检测到 Ct

    值或 Ct 值>38 或无明显扩增曲线,则样品判定为阴性。35≤Ct 值≤38 时,复检一次,重复结果为阳性者判

    定为阳性,否则判定为阴性。

    【注意事项】

    1、实验前请仔细阅读本试剂盒说明书,严格按照操作步骤执行,在操作过程中对时间、试剂体积等精

    确控制可以获得的结果。

    2、实验室应严格按照有关规定分区管理。各区间人员、器材、试剂及空气流向应有严格要求。

    3、有关耗材确保洁净、无菌,核酸提取完成后尽快进入下一步试验或冷冻保存。

    4、对于荧光 PCR 管要避免徒手或使用过的手套接触,检测过程中使用不带荧光物质一次性乳胶手套。

    5、冻存试剂使用前应于室温下完全融化,瞬时离心使液体完全沉于管底,操作时应注意避光,避免强

    光暴露和长时间光照。

    6、样品、阴性对照封盖后,在通风环境添加阳性对照并及时封盖,避免组分间及气溶胶等假阳性污染。

    7、扩增反应完毕后的 PCR 管严禁开盖,应和产生的其它试验废弃物一起及时收集,远离 PCR 实验室

    进行无害化处理。

    【规格】48 头份/盒。

    【贮藏与有效期】-20℃以下避光保存,有效期 12 个月。

    仅供兽医诊断使用