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国生非洲猪瘟病毒荧光 PCR 检测试剂盒(血液型)说明书
浏览:296次 添加时间:2024-09-24
 

非洲猪瘟病毒荧光 PCR 检测试剂盒(血液型)说明书

【产品货号】 NEQ11110 【产品名称】

通用名:非洲猪瘟病毒荧光 PCR 检测试剂盒(血液型)

商品名:无

英文名称:Real-time PCR Diagnostic Kit for African Swine Fever Virus(Type Blood Sample)

汉语拼音:Feizhou Zhuwen Bingdu Yingguang PCR Jiance Shijihe(Xueye Yangpin Xing) 【作用与用途】  用于抗凝血、血清等血液样品中非洲猪瘟病毒核酸的检测。

【主要成分与含量】

 

试剂盒组分

数量

装量

荧光 PCR 反应体系

1 /

550µl/

无菌无核酸酶水

1 /

400µl/

引物探针混合物

1 /

140µl/

阳性对照

1 /

40µl/

阴性对照

1 /

40µl/

 

【用法与判定】

1    用法

1.1    血液样品处理   EDTA 抗凝采血管采集血液,充分混匀,编号备用。样品处理后置 60℃灭活 30 分钟。

1.2    样品存放  采集或处理好的样品在 28℃保存应不超过 24 小时;若需长期保存,须放置-70℃ 下冰箱,并应避免反复冻融。

1.3    荧光 PCR 反应体系的配制  取出试剂盒中的各组分,置室温(15~25℃) 融化后瞬时离心,备用。 每次检验设阴、阳性对照。设待检样品、阳性对照和阴性对照的样品总份数为 n,按如下反应体系配制:

荧光 PCR 反应体系 引物探针混合物  无菌无核酸酶水

10μl×n+1 2.5μl×n+1 7μl×n+1

总量           19.5μl×(n+1)

将以上配制的反应体系充分混匀后,按 19.5μl/管分装至反应管中。分别取样品 0.5μl 加入相应反应管中, 盖紧管盖后瞬时离心。

1.4    荧光 PCR 反应条件

第一阶段:95℃ 20 秒;

第二阶段:95℃ 5 秒、60℃ 20 秒,共 40 个扩增循环。

荧光信号采集设定第二阶段退火(60℃ 20 秒)时;

对于 ABI 荧光 PCR 仪,选择 FAM 通道读取检测结果,淬灭基团选择MGB”;

对于其他品牌的荧光 PCR 仪,选定 FAM 通道读取检测结果,淬灭基团选择None”。

本产品使用特殊的 ROX Reference Dye,适用于所有 qPCR 仪器(无 ROX 校正仪器,低浓度 ROX 校正仪器,高浓度 ROX 校正仪器),无需在不同的仪器上调整 ROX 的浓度。

哈尔滨国生生物科技股份有限公司

 

2     试验成立条件  阳性对照 Ct 35 并出现典型的扩增曲线,阴性对照无 Ct 值或无典型的扩增曲 线,则判为试验成立。

3    判定  待检样品 Ct 35 并出现典型的扩增曲线,判为阳性;待检样品无 Ct 值或 35<Ct 40 并且无典型的扩增曲线,判为阴性。

【产品性能指标】  本试剂盒检测企业工作参考品,阴、阳性符合率均为 100%;精密度试验表明:批内和 批间重复性好,检测结果 Ct  值的变异系数均<10%; 分析灵敏度试验表明,本试剂盒最低检出量为 500copies/ml。与感染部位相同或感染症状相似的其他病毒无交叉反应。

【注意事项】

1  试剂盒应在−20℃以下保存和运输。

2  本试剂盒仅用于体外检测使用,操作人员必须经过培训,试剂盒使用前请仔细阅读说明书全文。

3  不要使用过期组分或者不同批次组分混合使用。

4  使用时尽量避免反复冻融,如冻融,应不超过 3 次。

5  样品采集和处理过程应戴一次性手套,并及时更换,样品间严禁交叉污染。

6  荧光 PCR 实验严格分区操作,各区应有专用的手套、移液器等,不得交叉使用,避免污染;工作人 员应遵循单方向工作原则,各工作区相对隔离。

7  进行荧光 PCR 实验的工作桌面及相关物品应定期用 1%次氯酸钠、75%酒精、1mol/L 盐酸依次灭菌 和消毒,或定期用紫外灯灭菌和消毒。

8  测试样品时,应做好生物安全防护。

9  试验完毕后,使用过的试剂盒、样品和试剂应进行无害化处理。 【规格】 50 份/盒

【贮藏与有效期】 −20℃以下保存,有效期为 12 个月。

【生产企业】